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总脂酶[脂蛋白脂酶(LPL)、肝脂酶(HL)]测定试剂盒（比色法）产品简介：

英文名：Lipoprotein lipase、Hepatic Lipas assay kit

规格：100管/48样

本试剂盒保存期：6个月。

贮存温度：2～8℃。

脂蛋白脂酶(LPL)存在肝外组织毛细血管内皮细胞表面,它主要催化血浆中乳糜微粒和极你密度脂蛋白中的甘油三酯水解,在CM和VLDL的降解中发挥重要作用.而肝脂酶(HL)则存在于肝内皮细胞表面,它主要在中密度脂蛋白和高密度脂蛋代谢中起重要作用.

　　脂蛋白脂酶(LPL)和肝脂酶(HL)可分解甘油三酯(TG)并水解为甘油及游离脂肪酸(FFA)，用铜试剂测定生成的游离脂肪酸(FFA)的量即可分别计算脂蛋白脂酶(LPL)和肝脂酶(HL)的活性。

　　肝脂酶为糖蛋白，其活性不需要载脂蛋白(apolipoprotin)CⅡ激活及一些离子的激活，不受高浓度盐及鱼精蛋白的抑制，利用此特点即可分别计算脂蛋白脂酶(LPL)和肝脂酶(HL)的活性。

总脂酶[脂蛋白脂酶(LPL)、肝脂酶(HL)]测定试剂盒（比色法）产品优点如下：

1、快速简便：全程约50分钟，可测100例左右样本。

2、取样量微：取样本量仅为50l

3、稳定性好：试剂盒2～8℃存放1个月有效。

4、再现性好：变异系数CV=1.7%。

5、回收试验： X =103.3%。

6、受外界影响因素小：干扰因素少，重复性强。

7、测试面广：可测动物血清（浆）、组织等，效果均佳。

总脂酶[脂蛋白脂酶(LPL)、肝脂酶(HL)]测定试剂盒（比色法）所需仪器及自备试剂：

1、可见分光光度计（比色测定波长为550nm）

2、恒温水浴箱或气浴箱 （孵育温度为37℃）

3、台式离心机

4、漩涡混匀器

5、微量移液器

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裂解液裂解 

常用裂解液有SDS、NP-40、TritonX-100,这三种去垢剂的作用是不同的，或者说作用力量强弱不同。

1、SDS属于离子型去垢剂，最厉害，基本可以把细胞完全破掉，DNA会释放出来，裂解液变得很粘稠。

2、NP-40是很温和的去垢剂，1%浓度的基本可以破坏掉胞膜，而对核膜破坏的作用弱，结合特定的buffer可以获得胞浆蛋白。

3、TritonX-100的能力介于NP40和SDS之间，偏向于NP40，也是常用的细胞裂解液成分之一，在保护蛋白活性方面有一定作用（SDS基本会使蛋白变性失活）。

去垢剂属性只是一方面，buffer、配比、浓度、提取方法和材料处理也都是关键因素

由于很多裂解液都是蛋白变性剂,对酶活力的测定有一定的影响,一般不推荐用裂解液进行裂解。

④ 反复冻融:

在细胞沉淀中加入一定量的PBS（PBS的加入量根据所测指标的不同而有所改变，一般加入0.5ml，细胞密度不小于一百万个/ml），混匀，将细胞悬浮于PBS中，放低温冰箱中结冰，溶解，再结冰，再溶解，反复3次左右）。

                由于反复冻融对酶活力影响较大,一般不推荐使用