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寨卡(zika)病毒试剂盒(荧光-PCR法)
  • 品牌:上海沪峥
  • 产地:国内
  • 型号:50T/盒
  • 货号:HXG706
  • 价格: ¥2380/盒
  • 发布日期: 2021-03-22
  • 更新日期: 2024-04-19
产品详请
产地 国内
品牌 上海沪峥
货号 HXG706
用途范围 仅用科研
规格 50T/盒
是否进口

寨卡(zika)病毒试剂盒(荧光-PCR法)为上海沪峥PCR主要产品之一,产品优势 样品种类多,质控严格,高特异性,供货快,已被国内外广大科研工作者使用,被称谓:质量信得过产品
通用名称:寨卡(zika)病毒试剂盒(荧光-PCR法)

规格:50T/盒

英文名称:zika Detection Kit (Real-Time PCR Method)

自备试剂:样品 RNA

【检验原理】

本试剂盒对寨卡(zika)病毒基因保守区设计特异性的引物和探针[1-3],用荧光 PCR 技术对核酸进行体外扩增检测,从而达到快速检测之目的。

寨卡(zika)病毒试剂盒(荧光-PCR法)试剂组成】

酶液

50μL×1 管

zika反应液

500μL×2 管

zika阳性质控品

50μl ×1 管

阴性质控品

250μl×1 管

【储存条件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、运输、反复冻融不超过 5 次。有效期 12 个月。

【适用仪器】

ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、MJ Opticon2、LightCycler480、Bio-Rad、eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。

【标本采集】取动物组织及其制品、食品或饲料约 1g。

【保存和运输】上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃。但不能超过 6 个月,标本运送应采用 0℃冰代。【使用方法】样品处理(样本处理区)


1.1 样本前处理:

取动物组织及其制品、食品或饲料约 1g,剪碎混匀后取 0.5g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至 1.5mL 灭菌离心管中, 8000rpm 离心 2min,取上清液 100μL 1.5mL 灭菌离心管中。

2 DNA 提取

样本 DNA 的提取采用 DNA 取试剂盒(离心柱提取法),请严格按照试剂盒说明书进行操作。

试剂配制(试剂准备区)

根据待检测样本总数,设所需要的 PCR 反应管管数为 N(N=样本数+1 管阴性对照+1 管阳性对照;样品每满 10 份,多配制 1 ),每测试反应体系配制如下表:

试剂

zika 反应液

酶液

用量

20μL

1μL

加样(样本处理区)


将步骤 1 提取的 DNA、阳性质控品、阴性质控品各取 4μL,加入相应的反应管中,盖好管盖,混匀,短暂离心。

PCR 扩增(核酸扩增区)

4.1 将待检测反应管置于荧光定量 PCR 仪反应槽内;

4.2 设置好通道、样品信息,反应体系设置为 25ul;荧光通道选择: 检测通道

Reporter Dye)FAM, 淬灭通道Quencher Dye)NONE,请勿选择 ROX 参比荧光。

4.3 推荐循环参数设置:

步骤

循环数

温度

时间

收集荧光信号

1

1 cycle

95℃

10min

2

40 cycles

94℃

15sec

55℃

30sec


意事项

:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。

1. 样本处理(样本处理区)

待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。

2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)

N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μlRT-PCR1 μl (也可根据每头份用量计算N+1FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)

组分每头份用量FMD  RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。

1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。

2.加样(样本处理区)

3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。