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牛病毒性腹泻病毒2型PCR检测试剂盒
  • 品牌：上海沪峥
  • 产地：国内
  • 货号：HZT2345
  • 价格： ￥2800/千克
  • 发布日期： 2021-03-16
  • 更新日期： 2024-07-24
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产地 国内
品牌 上海沪峥
货号 HZT2345
用途 仅科研
纯度 详询客服%
规格 50T/盒






产品特点：1、灵敏度高，抗污染能力强，定量准确，重复性好；2、样本处理与PCR扩增在同一个PCR反应管中即可完成；3、无需加热

产品说明：1.高便捷性。 2.灵敏度高。 3.特异性强。 4.精密性好。 5.结果准确可靠。 6.严格的质量标准。

结构及组成:聚合酶链式反应液（PCR反应液）、RNA提取液、DEPC水、内标模板、阴性质控品、阳性质控品。（具体内容详见说明书）


试剂盒准备物品：
清理液（A）                                    毫升
染色液（t B）                                  微升
稀释液（C）                                    毫升
溶解液（tD）                                   毫升
产品说明书                                       1份
反应五要素：
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数*个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。

P CR实验概述

 聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)自诞生之日起就决定了它不仅是一种高敏感、高特异的检测核酸分子的定性方法，而且也是一个能对核酸分子进行定量的有力工具。随着分子生物学技术研究的不断进展，定量PCR技术取得了突飞猛进的发展，实时定量PCR (real-timequantitative PCR)技术便是一种具有意义的定量PCR技术。所谓实时定量PCR是指在PCR指数扩增期间通过连续监测荧光信号强弱的变化来即时测定特异性产物的量，并据此推断目的基因的初始量。

PCR实验原理介绍

TaqMan荧光探针

PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，该探针为一寡核苷酸，两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；PCR扩增时，Taq酶的5'-3'外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，即每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成同步。

牛病毒性腹泻病毒2型PCR检测试剂盒注意事项：

1．基础程序。
2．扩增温度和延伸温度。
3．反应时间。
4．循环次数。
5．PCR 反应液的配制。
6．PCR技术的基本原理。
7．PCR的反应动力学。
8．PCR扩增产物。
9．PCR反应体系与反应条件。






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