鳜鱼弹状病毒(SCRV)试剂盒(荧光-PCR法)

规格：50T/盒

自备试剂：样品 RNA

【检验原理】

本试剂盒对鳜鱼弹状病毒(SCRV)基因保守区设计特异性的引物和探针[1-3]，用荧光 PCR 技术对核酸进行体外扩增检测，从而达到快速检测之目的。

【储存条件及有效期】

-20℃避光保存、运输、避免反复冻融，有效期12个月。

【适用仪器】

ABI系列、MJ系列、Roche系列、博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。
【保存和运输】

上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过6个月，标本运送应采用0℃冰代。

鳜鱼弹状病毒(SCRV)试剂盒(荧光-PCR法)它具有下列特点：

实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，*通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括*定量和相对定量）和定性分析。

主要服务：DNA或RNA的*定量分析、基因表达差异分析、基因分型。

主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

PCR反应五要素：

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物： 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。

一、样品 DNA 的制备

1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取

试剂盒兼容。

2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一

个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是在适量水（取决于试剂盒要求

的样品起始量）中加 10μL 人多瘤病毒 7 PCR 阳性对照的 10000倍稀释

液而得，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后 得到模板 DNA放

冰上待用。

二、设置 PCR 反应（40μL 体系）

3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性

对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：

成分 N+2 个

禽肺病毒（APV）试剂盒(荧光-PCR法)

禽偏肺病毒（aMPV）试剂盒(荧光-PCR法)

禽呼肠孤病毒(ARV)试剂盒（荧光-PCR法）

禽脑脊髓炎病毒（AEV）试剂盒(荧光-PCR法)

新城疫病毒中强毒(NDV-W)试剂盒(荧光-PCR法)

禽腺病毒C种4型(FADV-C-4)试剂盒（荧光-PCR法）

鸭肝炎病毒1型（DHV-1）试剂盒（荧光-PCR法）