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禽肺病毒(APV) 试剂盒(荧光-PCR法)
  • 品牌:上海沪峥
  • 产地:国内
  • 型号:50T/盒
  • 货号:HZW6539
  • 价格: ¥2680/盒
  • 发布日期: 2021-02-19
  • 更新日期: 2024-07-19
产品详请
产地 国内
品牌 上海沪峥
货号 HZW6539
用途 仅用科研
规格 50T/盒

【产品名称】

商品名称:禽肺病毒(APV)检测试剂盒(荧光-PCR法)


【包装规格】50 份/盒

【预期用途】

本试剂盒适用于检测的血清或血浆、疑似污染 REV 的活病

毒疫苗等标本中禽网状内皮组织增殖病病毒 RNA,适用于禽网状内皮组织增殖病病

毒感染的辅助诊断。其检测结果仅供参考。

禽肺病毒(APV)检测试剂盒(荧光-PCR法)【检验原理】

【储存条件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次,有效期 12 个月。

【适用仪器】

ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。

【标本采集】

水样便取 0.5~1mL;疑似污染的食物取 1g

【保存和运输】

上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过 6 个月,标本运送应采用 2~8℃冰袋运输,严禁反复冻融。

【使用方法】

1. 样品处理(样本处理区)

1.1 样本前处理

水样便 13000rpm 离心 2min,去尽上清;疑似污染的食物用手术剪剪碎混匀后取0.5g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至 1.5mL 灭菌离心管中,8000rpm 离心 2min,取上清液 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中;疑似污染的水直接取 100μL

1.2 DNA 提取

1) DNA 的提取也可以采用DNA 提取试剂盒(离心柱提取法),请严格按照试剂盒说明书进行操作。

本试剂盒用一对禽网状内皮组织增殖病病毒特异性引物,结合一条特异性荧光

探针,用一步法荧光 RT-PCR 技术对禽网状内皮组织增殖病病毒 RNA 进行体外扩

增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

【试剂组成】

名 称 规 格

酶液 50μl×1 管

REV 反应液 1.0ml×1 管

REV 阳性质控品 50μl ×1 管

阴性质控品 250μl ×1 管

说明:不同批号的试剂盒组分不可交互使用。

禽肺病毒(APV)检测试剂盒(荧光-PCR法) 结果分析条件设定

设置 Baseline 和 Threshold:一般直接按机器自动分析的结果分析,当曲线出现整体倾斜时,根据分析后图像调节Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范围内调节)、stop 值(一般可在 5~20 范围内调节),以及 Threshold 的 Value 值(上下拖动阈值线至高于阴性对照),重新分析结果。

1.2 结果判断

阳性:检测通道 Ct 值≤35,且曲线有明显的指数增长曲线;

可疑:检测通道 35 值≤38,建议重复检测,如果检测通道仍为 35 值≤38, 且曲线有明显的增长曲线,判定为阳性,否则为阴性;

阴性:样本检测结果 Ct 值>38 或无 Ct 值。


2. 质控标准

阴性质控品:Ct 值>38 或无 Ct 值;

阳性质控品:扩增曲线有明显指数生长期,且 Ct 值≤32; 以上条件应同时满足,否则实验视为无效。

3. 检测方法的局限性

? 样本检测结果与样本收集、处理、运送以及保存质量有关;

? 样本提取过程中没有控制好交叉污染,会出现假阳性结果;

? 阳性对照、扩增产物泄漏,会导致假阳性结果;

? 病原体在流行过程中基因突变、重组,会导致假阴性结果;

? 不同的提取方法存在提取效率差异,会导致假阴性结果;

? 试剂运输,保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降,出现假阴性或定 量检测不准确的结果;

? 本检测结果仅供参考,如须确诊请结合临床症状以及其他检测手段。

【注意事项】

? 所有操作严格按照说明书进行;

? 试剂盒内各种组分使用前应自然融化,完全混匀并短暂离心;

? 反应液应避光保存;

? 反应中尽量避免气泡存在,管盖需盖紧;

? 使用一次性吸头、一次性手套和各区专用工作服;

? 样本处理、试剂配制、加样需在不同区进行,以免交叉污染;

? 实验完毕后用 10%次氯酸或 75%酒精或紫外灯处理工作台和移液器;

? 试剂盒里所有物品应视为污染物对待,并按照《微生物生物医学实验室生物安全通 则》进行处理。