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牛源性成分(Bovine)检测试剂盒(PCR法)
物品单位 价格 品牌
千克 1380 上海沪峥
  • 产地:国内
  • 货号:HZW0825
  • 发布日期: 2020-03-12
  • 更新日期: 2023-01-29
产品详细说明
产地 国内
品牌 上海沪峥
货号 HZW0825
用途范围 仅限科研
纯度 详询客服%
CAS编号
规格 48T/盒
是否进口


产品名称:牛源性成分(Bovine)核酸检测试剂盒(PCR法) 
包装:48T
分类:pcr-荧光试剂盒
用途:本产品仅供科研与实验使用,不用于临床诊断等
目的:本试剂盒适用于检测疑似感染者或发病动物等组织、体液或淋巴结等标本中禽流感病毒rna,用于禽流感病毒感染的辅助诊断,其检测结果仅供参考。
牛源性成分(Bovine)核酸检测试剂盒(PCR法)  PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。探针完整时,报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收;刚开始时探针结合在DNA任意一条单链上;PCR扩增时,Taq酶的5’端-3’端外切酶活性将探针酶切降解,使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离,从而荧光监测系统可接收到荧光信号,即每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。

牛源性成分(Bovine)核酸检测试剂盒(PCR法) 

PCR 管中加入下列成分:

 

 

成份

 

 

样品

 

 

阳性对照

 

 

阴性对照

 

双酶一管式 RT-PCR Buffer

15 uL

15 uL

15 uL

EMCV 专一性引物对

2 uL

2 uL

2 uL

样品 RNA

1-5 uL

2 uL

EMCV 阳性对照

2 uL

补超纯水到

28 uL

28 uL

MMLV-Taq Mix

2 uL

2 uL

2 uL

[1] 轻柔混匀后上机,按下面参数进行 RT-PCR。

牛源性成分(Bovine)核酸检测试剂盒(PCR法) 电泳检测RT-PCR 产物。预期的PCR 产物长度为 286 bp。

牛源性成分(Bovine)核酸检测试剂盒(PCR法)  产品特点:

◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;

◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;

◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;

◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。

需要注意*:

PCR反应液请在冰中配制,然后置于PCR反应仪上进行PCR反应。这种冷启动法(Cool Start Method)与热启动法(Hot Start Method)相结合,更能有效地减少PCR过程中的非特异性反应,增强PCR扩增的特异性,能得到良好的PCR结果。

PCR的反应条件:

因扩增片段的大小、反应体积、使用扩增仪器的不同而不同。

◇ 循环次数

根据模板DNA的量以及扩增片段的大小,设定25~30个循环。

如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,则会出现Smear。


实验操作

1.模板制备(样本制备区)
建议使用配套水生动物病毒基因组DNA/RNA提取试剂盒系列产品,具体过程详见产品说明书。
2.添加模板(模板添加区,放置于冰盒上进行)
剪下所需测试数的已含有反应液的PCR管,放置在室温待解冻后,离心30秒后揭开封口膜,向每管反应液中分别加入5μL模板,顺序为NG、待测样品模板、PG-VH-P。盖好配套的PCR管盖后,涡旋混匀30s,离心1min,立即进行PCR扩增反应。
3. 扩增反应(扩增及产物分析区)
使用荧光定量PCR仪,荧光基团选择FAM,淬灭基团选择TAMRA