腐败支原体PCR检测试剂盒产品及特点:具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点,值得信赖的PCR技术新方法

参数规格：

产品名称：腐败支原体PCR检测试剂盒

英文名称:PCR Detection Kit for Mycoplasma Putrefaciens

产品规格：20T/50T/100T

产品运输：低温运输

储存条件】 反应试剂盒存于-20 ℃保存，尽量避免反复冻融。

【有效期】 本试剂盒有效期为十二个月。

腐败支原体PCR检测试剂盒反应五要素：

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：

①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基，特别是最末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子*很有好处。

⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。

腐败支原体PCR检测试剂盒注意事项:

1. 试剂盒各组份使用前请充分融化并摇匀,离心管内的试剂需离心数秒后使用。 2 PCR操作各阶段应在不同实验室进行。

3 在试剂和标本准备阶段使用负压超净台。

4 应穿工作服，戴一次性手套（经常替换手套），使用一次性用品。

5 PCR操作人员应具有经验和受过培训。

6操作过程中用到的超净台、移液器、离心机、扩增仪等仪器设备应经常用10%次氯酸或70%乙醇或 紫外灯处理。

7 阳性对照应和待检标本平行进行操作后方可进行PCR扩增。

8 使用本试剂盒应视为有传染性物质，请按传染病实验室检查规程操作。

9本试剂盒仅供科研使用。