小鼠免疫球蛋白IgE试剂盒说明书 详细介绍

名    称：小鼠免疫球蛋白IgE试剂盒 说明书检测种属：小鼠

标记物：HRP

检测方法：酶联免疫法

检测波长：450nm

规    格：96孔/48孔

保 质 期：6个月
保存温度：2-8℃

所需样本体积：50-100ul

产    地：国产(上海)/进口(美国)

适用范围：仅供科研，不得用于其他用途，禁止用于临床

上海沪峥生物ELISA试剂盒现货供应，价格实惠，质量保证，免费待测，想要更多了解公司产品及优惠信息，请来电咨询或在线咨询！欢迎您的来电,如有需要我们将竭诚为您服务！

一、ELISA实验中血清的采集、处理和保存；

1、 真空采血针采集2ml新鲜血液，加入无菌试管中；

2、 采血后室温静置1小时；

3、 将采集血液用离心机4℃，2500rpm离心10min，，将离心好的匀浆留上清，弃下面沉淀。

4、 取上清。 分装冻存备用，

2-8℃下，可放置保存24-48小时；

-20℃下，可放置保存1个月；

-70℃下，可放置保存6个月；

5、 根据你的实验需要，取适量上清夜进行各种ELISA测定。 

大部分ELISA检测均以血清为标本。血清标本可按常规方法采集，应注意避免溶血，红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质，以HRP为标记的 ELISA测定中，溶血标本可能会增加非特异性显色。此外还应避免细菌污染，因为菌体中可能含有含有内源性HRP，也会产生假阳性反应。血清标本宜在新鲜 时检测。如在冰箱中保存过久，其中的可发生聚合，在间接法ELISA中可使本底加深。

二、ELISA实验中血浆的采集、处理和保存；

1、 真空采血针采集2ml新鲜血液，加入无菌试管中；

2、 按1:9加入抗凝剂（EDTA、草酸钠、肝素、枸橼酸钠），30分钟内于冰上分离血浆以减少血小板的污染；（也可以直接用抗凝管采集）；

3、 将采集血液用离心机4℃，2500rpm离心5min，，将离心好的匀浆留上清，弃下面沉淀。

4、 取上清。 分装冻存备用，

2-8℃下，可放置保存24-48小时；

-20℃下，可放置保存1个月；

-70℃下，可放置保存6个月；

5、 根据你的实验需要，取适量上清夜进行各种ELISA测定。 请注意指标说明书上对于抗凝血剂是否有特殊要求，建议使用EDTA。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外，其他成份均同等于血清。

注意事项：制备血浆标本需借助于抗凝剂EDTA,抗凝不完全的标本因纤维蛋白原干扰而造成假阳性。

三、ELISA 实验中尿液的采集、处理和保存；

1、 采集尿液样本500ul，加入无菌试管中；

2、 将采集血液用离心机4℃，2500rpm离心10min，，将离心好的样本留上清，弃下面沉淀。

3、 取上清。 分装冻存备用，

2-8℃下，可放置保存24-48小时；

-20℃下，可放置保存1个月；

-70℃下，可放置保存6个月；

4、 根据你的实验需要，取适量上清夜进行各种ELISA测定。

四、ELISA 实验中脑脊液的采集、处理和保存；

1、采集脑脊液样本，加入无菌试管中；

2、将采集血液用离心机4℃，2500rpm离心10min，，将离心好的样本留上清，弃下面沉淀。

3、取上清。 分装冻存备用，

2-8℃下，可放置保存24-48小时；

-20℃下，可放置保存1个月；

-70℃下，可放置保存6个月；

4、根据你的实验需要，取适量上清夜进行各种ELISA测定。

五、ELISA 实验中细胞上清液的采集、处理和保存；

1、采集细胞培养上清液500ul，加入无菌试管中；

2、将采集血液用离心机4℃，2500rpm离心10min，，将离心好的匀浆留上清，弃下面沉淀。

3、取上清。 分装冻存备用，

2-8℃下，可放置保存24-48小时；

-20℃下，可放置保存1个月；

-70℃下，可放置保存6个月；

4、根据你的实验需要，取适量上清夜进行各种ELISA测定。

六、ELISA 实验中细胞裂解液的采集、处理和保存；（需要测蛋白浓度）

1、 取细胞培养板或细胞悬液，用PBS（PH7.2-7.4）洗涤细胞培养板1-2次。

2、 通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂（裂解液），使细胞破坏并放出细胞内成份。

3、 将采集血液用离心机4℃，2500rpm离心20min，，将离心好的匀浆留上清，弃下面沉淀。

4、 取上清。 分装冻存备用，

2-8℃下，可放置保存24-48小时；

-20℃下，可放置保存1个月；

-70℃下，可放置保存6个月；

1、试剂未平衡至室温：实验开始前，将试剂盒从冰箱取出平衡至室温。
2、检测体积偏小：检查移液器吸液管道是否堵塞。
3、孵育时间过短：使用计时器，准确孵育时间。
4、底物受污染：使用新配置的试剂，重新实验。
5、包装袋中有湿气：检查袋中是否有干燥剂。
6、样本中有抑制剂：叠氮钠会抑制HRP酶的活性。

1、倍比稀释标准品时未混匀：稀释标准品的每一步均需混匀。
2、过早稀释：标准品在快要使用时稀释。
3、标准品稀释错误：严格按照说明书要求稀释标准品。
4、加入的体积不正确：使用校准过的移液器，快速、等量的将标准品分配到各个微孔中。
5、波长选择错误：TMB为底物和以OPD为底物的试剂盒均有使用，而 前者比色波长为450nm，后者为492nm。双波长比色分析优于单波长。
6、标准品混用：不同批号试剂勿混用。
7、试剂盒在运输途中时间太长，温度太高，标准品失活：尽量缩短运输时间，夏季应放冰块降温。