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总蛋白定量测定试剂盒(带标准:BCA法)(比色法)
  • 品牌:上海沪峥
  • 产地:国产
  • 货号:HZA045-3
  • 价格: ¥380/盒
  • 发布日期: 2020-06-24
  • 更新日期: 2024-05-06
产品详请
产地 国产
品牌 上海沪峥
货号 HZA045-3
用途范围 科研
纯度 %
规格 50管/48样

上海沪峥视创新为生命,具备快速高效研发、生产能力,汇集了大量生物工程行业的高尖人才,与国内*科研院校联合开发新产品试剂盒,建立了产、学、研相结合的科研攻关协作组和技术合作体,在生物技术行业拥有极强的竞争力。形成多品种、规模化,集生物工程、科研试剂于一体的研发、生产、销售产业实体。

总蛋白定量测定试剂盒(带标准:BCA法)(比色法)产品简介:

英文名:The total protein assay kit ( with standard : BCA method )

规格:100/96

本试剂盒保存期:6个月。

贮存温度:28℃。

BCA(bicinchonininc acid)与二价铜离 子的硫酸铜等其他试剂组成的试剂,混合一起即成为苹果绿,即BCA工作试剂。在碱性条件下,BCA与蛋白质结合时,蛋白质将Cu2+还原为Cu+,一个 Cu+螯合二个BCA分子,工作试剂由原来的苹果绿形成紫色复合物,*光吸收强度与蛋白质浓度成正比。

1 操作简单,快速,45分钟内完成测定,比经典的Lowary法快4倍且更加方便;

2 准确灵敏:试剂稳定性好,BCA试剂的蛋白质测定范围是20-200μg/ml

3 经济实用,除试管外,测定可用微板法操作,大大节约样品取样量;

4 抗试剂干扰能力比较强,如去垢剂,尿素等均无影响

所需仪器及自备试剂:

1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为562nm

2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)

3、漩涡混匀器

4、微量移液器

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在4℃下将硫酸铵粉末按50%饱和量加入上述粗制IL-2中,搅拌2h,12000g离心30min,取上清液,再加入80%饱和硫酸铵,4℃过夜,次日以12000g离心30min,弃上清液,将沉淀溶于1% PEG 6 000的1∶2 PBS溶液(pH值73)中,置真空负压浓缩透析器中透析浓缩至所需容量。 

  2.2 Sephadex G100凝胶过滤:用2×180cm的过滤柱及PBS(同上),以80ml/h流速过滤。将各管洗脱液用紫外分光光度计280nm检测其OD值。同时将几种不同分子量的标准蛋白也用相同条件过滤及检测其OD值,绘出IL-2及标准蛋白OD值的曲线。将各管洗脱液过滤除菌后,作白细胞生物活性试验,按试验结果绘出曲线,找出具有*IL2活性的几管洗脱液,混合后,作下一步精制。 

  2.3 BlueSepharose层析:将上述混合后的洗脱液加入BlueSepharose柱中,流速约15ml/h,按每管10ml收集流出液,当样品全部流出柱中以后,用上述PBS洗涤样品柱,再用梯度NaCl溶液(从0075mol/L至06mol/L NaCl的PBS溶液)洗脱,按2ml/管收集洗脱液。NaCl 溶液梯度及流速均由梯度混合器调节控制。洗脱完毕后,作各管OD值及NaCl浓度的测定。各管洗脱液过滤除菌后,作出生物活性测定。将峰值前后的数管洗脱液混合,即为精制的IL2。置-20℃冰箱保存。