牛（Bovine）抑肽酶（AP）ELISA检测试剂盒产品参数

名称：牛（Bovine）抑肽酶（AP）ELISA检测试剂盒

规格：48T/96T

保存温度：2-8度

有效期：6个月

本试剂盒 于科学科研使用，请勿用于医药、临床诊断 或 ，食品及化妆品等用途。

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被抗体的微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并 洗涤。用底物TMB显色   ，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化 最终的黄色。颜色的深浅和样品中的呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度   。

牛（Bovine）抑肽酶（AP）ELISA检测试剂盒组成及试剂配制 :

1. 酶联板：一块(96孔) 

2. 标准品(冻干品)：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为100 ng/ml，做系列倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)后，分别稀释成100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml，1.56 ng/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0 ng/ml，临用前15分钟内配制。

如配制50 ng/ml标准品：取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。

3. 样品稀释液：1×20ml/瓶。

4. 检测稀释液A：1×10ml/瓶。

5. 检测稀释液B：1×10ml/瓶。

6. 检测溶液A：1×120ul/瓶(1:100)临用前以检测稀释液A 1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100ul/孔)，实际配制时应多配制0.1-0.2ml。如10ul检测溶液A加990ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。

    样品类型（SAMPLE TYPES）： 标本必须为液体，不含沉淀。包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等。1ml的全血可得到0.5ml的血清

或血浆。每个标本量收集体积＝100ul×检测种类。取材前须向销售人员索要说明书。

   样品采集：收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本，储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，

将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时，-20℃可保存1个月。-70度可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。 

  操作步骤：参照说明书灵敏度:具体请查看说明书.检测范围（RANGN）：具体请查看说明书.

本试剂盒 于科学科研使用，请勿用于医药、临床诊断 或 ，食品及化妆品等用途。

试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被抗体的微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并 洗涤。用底物TMB显色   ，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化 最终的黄色。颜色的深浅和样品中的呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度   。

生物安全

1. 检测必须符合实验室管理规范的规定，严格防止交叉污染，所有样品、洗弃液和各种废弃物都应按照传染物进行处置。

2.试剂盒的液体组分中，含有Proclin-300防腐剂，可能引起皮肤过敏反应，避免吸入烟雾与皮肤接触。

3.底物液对皮肤、眼睛和上呼吸道有刺激作用，避免吸入烟雾。戴上防护手套，实验完成后 洗手。

技术提示

1.混合蛋白溶液时，避免起泡。

2.加校准品与样本时，每个校准品浓度和样本都要更换移液枪头，公共组分应该悬臂加样 ，避免交叉污染。

3.合适的温育时间，和充分的洗涤步骤，是保证实验结果准确性的必要条件。

4.底物溶液为无色液体，保存过程中变为蓝色，代表底物溶液已经失效，不得使用。

5.终止液加样顺序与底物溶液加样顺序一致，加入终止液后，蓝色底物产物，会瞬间变为黄色，

6.实验中，用剩的板条，应立即放回自封袋中，密封（低温干燥） 保存。

7.所有液体组分，使用前充分摇匀， 严格按照说明书标明的时间、加样量及加样顺序进行温育操作。