原代冻存或复苏培养，复苏时间1-2周，保证细胞纯度在98%以上，同时也需经过微生物检测，保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌.

细胞名称 ：人胚肾细胞

简称: AAV-293

组织来源：肾；以腺病毒5 DNA 进行转化

培养条件：DMEM（高糖）+10% FBS+1% P/S

形       态：贴壁；上皮细胞样

背       景：我们推荐使用AAV-293细胞株繁殖腺病毒相关重组病毒。AAV-293源自普遍使用的 HEK293细胞株，但产生的病毒滴度更高。跟HEK293细胞一样，AAV-293细胞反式表达腺病毒E1基因，当共转染三个AAV助质粒(一个含ITR的质粒，pAAV-RC和E1缺失助质粒)时，可以产生有感染力的腺病毒-相关病毒颗粒。

细胞数: 1×106cells

规格: 1ml/T25

运输保存:采用干冰保存运输

细胞用途：仅供科研使用

人胚肾细胞，AAV-293培养操作规程仅供参考

准备好培养基及培养冻存条件及冻存液。

细胞处理

复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。 天换液并检查细胞密度。

细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养

细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，先要消化处理并进行细胞计数。消化方法按照细胞传代方法的1-3步骤进行，*的重悬液使用血清。悬浮细胞直接计数后离心，用血清重悬浮，加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀，按每1ml的数量分配到冻存管中。

人胚肾细胞，AAV-293购买细胞注意事项：

1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。

3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。

4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件.

6. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。

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