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产地 | 国产 |
保存条件 | 2-8 |
品牌 | 上海沪峥 |
货号 | HS3249 |
用途 | 仅用科研 |
检测方法 | 酶联免疫 |
保质期 | 6个月 |
适应物种 | 人 |
检测限 | 详见说明书 |
数量 | 99 |
英文名称 | Human heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor,HB-EGF ELISA kit |
包装规格 | 48T/96T |
标记物 | HRP标记物 |
样本 | 血清/血液/尿液/组织 |
应用 | 仅科研 |
是否进口 | 否 |
沪峥供应是真正的“即用”试剂盒。不需添加试剂或进行设置的试剂盒。我们的试剂盒——只需打开盒子,一切就绪。简易实用的检测方法大大的减小了出错机率。
中文名称:人肝素结合性表皮生长因子(HB-EGF)ELISA试剂盒
英文名称:Human heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor,HB-EGF ELISA kit
规格:48T/96T
种属:人
特色运输 顺丰速运 独特优势 特异性强,重复性好,批间差小
用途 科研课题专用,不得用于临床诊断
操作实验步骤:
1.标本的采取和保存:
可用作ELISA测定的标本十分广泛,体液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、粪便)等均可作标本以测定其中某种抗体或抗原成份。有些标本可直接进行测定(如血清、尿液),有些则需经预处理(如粪便和某些分泌物)。大部分ELISA检测均以血清为标本。血浆中除尚含有纤维蛋白原和抗凝剂外,其他成份均同等于血清。制备血浆标本需借助于抗凝剂,而血清标本只要待血清自然凝固、血块收缩后即可取得。除特殊情况外,在医学检验中均以血清作为检测标本。在ELISA中血浆和血清可同等应用。血清标本可按常规方法采集,应注意避免溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为标记的ELISA测定中,溶血标本可能会增加非特异性显色。
2.试剂的准备:
按试剂盒说明书的要求准备实验中需用的试剂。ELISA中用的蒸馏水或去离子水,包括用于洗涤的,应为新鲜的和高质量的。自配的缓冲液应用pH计测量较正。从冰箱中取出的试验用试剂应待温度与室温平衡后使用。试剂盒中本次试验不需用的部分应及时放回冰箱保存。
3.加样:
在ELISA中一般有3次加样步聚,即加标本,加酶结合物,加底物。加样时应将所加物加在LEISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。加标本一般用微量加样器,按规定的量加入板孔中。每次加标本应更换吸嘴,以免发生交叉污染,也可用一次性的定量塑料管加样。有此测定(如间接法ELISA)需用稀释的血清,可在试管中按规定的稀释度稀释后再加样。也可在板孔中加入稀释液,再在其中加入血清标本,然后在微型震荡器上震荡1分钟以保证混和。加酶结合物应用液和底物应用液时可用定量多道加液器,使加液过程迅速完成。
4:保温:
在ELISA中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。抗原抗体反应的完成需要有一定的温度和时间,这一保温过程称为温育(incubation),有人称之为孵育,在ELISA中似不恰当。ELISA属固相免疫测定,抗原、抗体的结合只在固相表面上发生。以抗体包被的夹心法为例,加入板孔中的标本,其中的抗原并不是都有均等的和固相抗结合的机会,只有最贴近孔壁的一层溶液中的抗原直接与抗体接触。这是一个逐步平衡的过程,因此需经扩散才能达到反应的终点。在其后加入的酶标记抗体与固相抗原的结合也同样如此。这就是为什么ELISA反应总是需要一定时间的温育。
5.洗涤:
洗涤在ELISA过程中虽不是一个反应步骤,但却也决定着实验的成败。ELISA是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相。
免
沪峥生物试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA).往预先包被间接胆红素(IBIL-)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并 洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的间接胆红素(IBIL-)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
免责声明:
试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验,否则所产生的一切后果由实验者承担,本公司概不负责。
严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。