猪γ干扰素(IFN-γ)ELISA*上海沪峥！您做实验的*伙伴！

英文名称：PoFAine Interferon γ ,IFN-γ ELISA kit

猪γ干扰素(IFN-γ)ELISA产品优势：

1.精心挑选的抗体，对照品/标准品，显色剂和酶标板全部为进口产品实现*性能，原材料批量进口加上自配的特殊配方稀释剂保证高品质产品性能的同时兼顾成本。

2..采用先进专利技术，严格按照标准生产方案组装生产，预包被微孔板的批内和批间变异系数均小于10 ％。

3.经过严格交叉反应和干扰测试及稳定性试验，实验结果稳定可靠。

4.明确的敏感度，针对所有样品类型达到*的性能，广泛的检测范围可以满足大多数检测要求。

5.强大的生产能力和充足的储备、操作熟练的技术人员及高效的生产流程，随时可以组装出您定制的产品。

6.完善的售后服务和免费的技术支持免去您的后顾之忧。

猪γ干扰素(IFN-γ)ELISA实验步骤：

标本收集:
1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟，取上清即可检测，收集血液的试管应为一次性的无热原，无内毒素试管。
2.血浆：抗凝剂推荐使用EDTA，标本采集后30分钟内于 1000×g离心15分钟，取上清即可检测。避免使用溶血，高血脂标本。
3. 其它生物标本：1000×g离心20分钟，取上清即可检测
4. 标本应清澈透明，悬浮物应离心去除。
5.标本收集后若不及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃/-80℃电冰箱内，避免反复冻融，1-6月内检测,4℃保存的应在1周内进行检测。
6. 如果您的样本中检测物浓度高于标准品*值，请根据实际情况，做适当倍数稀释(建议先做预实验，以确定稀释倍数)。
试验所需自备物品:
1.  酶标仪(450nm波长滤光片)
2.  高精度移液器，EP管及一次性吸头：0.5-10μl, 2-20μl, 20-200μl, 200-1000μl
3.  37℃恒温箱, 双蒸水或去离子水
4.  吸水纸
检测前准备工作:
1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒，平衡至室温。
2. 将浓缩洗涤液用双蒸水稀释(1:25)。未用完的放回4℃。从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶，属于正常现象，可用40℃水浴微加热使结晶完全溶解后再配制洗涤液。(加热温度不要超过50℃)使用时洗涤液应为室温。
3.  标准品: 加入标准品&标本稀释液1.0ml至冻干标准品中，静置10分钟，待其充分溶解后，轻轻混匀(浓度为5000 pg/ml)。然后根据需要进行倍比稀释(注：不要直接在板中进行倍比稀释)。建议配制成以下浓度： 2500、1250、625、312.5、156.2、78.1、39.05、0 pg/ml。样品稀释液直接作为空白孔 0 pg/ml。如配制2500pg/ml标准品：取0.5ml (不要少于0.5ml )5000pg/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的EP管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
4. 生物素化抗体工作液：实验前计算当次实验所需用量(以100μl/孔计)，实际配制时应多配制100-200μl。使用前15分钟，以生物素化抗体稀释液稀释浓缩生物素化抗体(1:100)成工作浓度。当日使用。
5. 酶结合物工作液：实验前计算当次实验所需用量(以100μl/孔计)，实际配制时应多配制  100-200μl。使用前15分钟，以生物素化抗体稀释液稀释浓缩生物素化抗体(1:100)成工作浓度。当日使用。

1.  血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2.  血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。  

3.  尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。  

4.  细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5.  组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

6.  标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.

 7. 不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。

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