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单纯疱疹病毒(HSV)试剂盒(荧光-PCR法)
  • 品牌:上海沪峥
  • 产地:国内
  • 型号:50T/盒
  • 货号:HXG686
  • 价格: ¥2380/盒
  • 发布日期: 2021-03-18
  • 更新日期: 2024-07-19
产品详请
产地 国内
品牌 上海沪峥
货号 HXG686
用途 仅用科研
规格 50T/盒
是否进口

单纯疱疹病毒(HSV)试剂盒(荧光-PCR法)

规格:50T/盒

英文名称:HSV Detection Kit (Real-Time PCR Method)

【包装规格】50T/盒

自备试剂:样品 RNA

【检验原理】

本试剂盒对单纯疱疹病毒(HSV)基因保守区设计特异性的引物和探针[1-3],用荧光 PCR 技术对核酸进行体外扩增检测,从而达到快速检测之目的。

试剂组成】

名 称

规 格

酶液

50μL×1 管

HSV反应液

500μL×2 管

HSV阳性质控品

50μl ×1 管

阴性质控品

250μl×1 管


【储存条件及有效期】

-20℃避光保存、运输、避免反复冻融,有效期12个月。

【适用仪器】

ABI系列、MJ系列、Roche系列、博日系列及其他荧光定量PCR检测仪。
【保存和运输】

上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过6个月,标本运送应采用0℃冰代。

结果判断

阳性:检测通道 Ct 值≤35,且曲线有明显的指数增长曲线;

可疑:检测通道 35值≤38,建议重复检测,如果检测通道仍为 35值≤38, 且曲线有明显的增长曲线,判定为阳性,否则为阴性;

阴性:样本检测结果 Ct 值>38 或无 Ct 值。

质控标准

阴性质控品:Ct 值>38 或无 Ct 值;

阳性质控品:扩增曲线有明显指数生长期,且 Ct 值≤32; 以上条件应同时满足,否则实验视为无效。

PCR是利用DNA在体外摄氏95°高温时变性会变成单链,低温(经常是60°C左右)时引物与单链按碱基互补配对的原则结合,再调温度至DNA聚合酶最适反应温度(72°C左右),DNA聚合酶沿着磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互补链。基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备,能在变性温度,复性温度,延伸温度之间很好地进行控制。

实时荧光定量PCR技术,是指在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程, 通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。


单纯疱疹病毒(HSV)试剂盒(荧光-PCR法)样本提取操作

1. 取 200μL 处理好的样本(不足 200μL,可以加入 PBS 缓冲液或者生理盐水补足 200μL),加入 500μL

裂解液,振荡 30 秒,室温静止 2 分钟。注:针对   难裂解样本,室温静置时间可延长至5 分钟。

2. 把上述混合液转移到吸附柱中(吸附柱要套上收集管,吸取液体时尽量不要吸到悬浮杂质,以免阻塞吸附膜),10000rpm 离心 1 分钟,弃去套管中液体。

3. 向吸附柱中加入 500μL 去蛋白漂洗液,12000rpm 离心 30 秒,弃去套管中液体。

4. 向吸附柱中加入 500μL 洗涤液,12000rpm 离心 30 秒,弃去套管中液体。

5. 向吸附柱中加入 500μL 洗涤液,12000rpm 离心 30 秒,弃去套管中液体。

6. 12000rpm 再次离心 2 分钟。

7. 把吸附柱转移至新的 1.5mL 灭菌离心管中,向吸附柱中加入 50μL 洗脱液,并于室温温育 2 分钟。

8.12000rpm 离心 1 分钟,弃去吸附柱,1.5mL 灭菌离心管中液体即为 DNA/RNA 溶液。提取的 DNA/RNA

可直接用于各种下游应用试验,如不立即使用,请于-80℃保存。