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禽偏肺病毒(aMPV) 试剂盒(荧光-PCR法)
  • 品牌:上海沪峥
  • 产地:国内
  • 型号:50T/盒
  • 货号:HZW6540
  • 价格: ¥2680/盒
  • 发布日期: 2021-02-19
  • 更新日期: 2024-05-23
产品详请
产地 国内
品牌 上海沪峥
货号 HZW6540
用途范围 仅用科研
规格 50T/盒

【产品名称】

商品名称:禽偏肺病毒(aMPV)检测试剂盒(荧光-PCR法)


【包装规格】50 份/盒

【预期用途】

本试剂盒适用于检测的血清或血浆、疑似污染 REV 的活病

毒疫苗等标本中禽网状内皮组织增殖病病毒 RNA,适用于禽网状内皮组织增殖病病

毒感染的辅助诊断。其检测结果仅供参考。

禽偏肺病毒(aMPV)检测试剂盒(荧光-PCR法)【检验原理】

【储存条件及有效期】

-20℃±5℃,避光保存、运输、反复冻融次数不超过 5 次,有效期 12 个月。

【适用仪器】

ABI 、安捷伦 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、Eppendorf 等系列荧光定量 PCR 检测仪。

【标本采集】

水样便取 0.5~1mL;疑似污染的食物取 1g

【保存和运输】

上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70℃,但不能超过 6 个月,标本运送应采用 2~8℃冰袋运输,严禁反复冻融。

【使用方法】

1. 样品处理(样本处理区)

1.1 样本前处理

水样便 13000rpm 离心 2min,去尽上清;疑似污染的食物用手术剪剪碎混匀后取0.5g 于研磨器中研磨,加入 1.5mL 生理盐水后继续研磨,待匀浆后转至 1.5mL 灭菌离心管中,8000rpm 离心 2min,取上清液 100μL 于 1.5mL 灭菌离心管中;疑似污染的水直接取 100μL

1.2 DNA 提取

1) DNA 的提取也可以采用DNA 提取试剂盒(离心柱提取法),请严格按照试剂盒说明书进行操作。

本试剂盒用一对禽网状内皮组织增殖病病毒特异性引物,结合一条特异性荧光

探针,用一步法荧光 RT-PCR 技术对禽网状内皮组织增殖病病毒 RNA 进行体外扩

增检测,用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

【试剂组成】

名 称 规 格

酶液 50μl×1 管

REV 反应液 1.0ml×1 管

REV 阳性质控品 50μl ×1 管

阴性质控品 250μl ×1 管

说明:不同批号的试剂盒组分不可交互使用。

禽偏肺病毒(aMPV)检测试剂盒(荧光-PCR法) 结果分析条件设定

设置 Baseline 和 Threshold:一般直接按机器自动分析的结果分析,当曲线出现整体倾斜时,根据分析后图像调节Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范围内调节)、stop 值(一般可在 5~20 范围内调节),以及 Threshold 的 Value 值(上下拖动阈值线至高于阴性对照),重新分析结果。

1.2 结果判断

阳性:检测通道 Ct 值≤35,且曲线有明显的指数增长曲线;

可疑:检测通道 35 值≤38,建议重复检测,如果检测通道仍为 35 值≤38, 且曲线有明显的增长曲线,判定为阳性,否则为阴性;

阴性:样本检测结果 Ct 值>38 或无 Ct 值。

2. 质控标准

阴性质控品:Ct 值>38 或无 Ct 值;

阳性质控品:扩增曲线有明显指数生长期,且 Ct 值≤32; 以上条件应同时满足,否则实验视为无效。


反应五要素:

 

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:

①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。

②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC*随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。

⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数 个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列*有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。

引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。

 

大鼠组织蛋白酶K(CTSK)ELISA试剂盒 Rat CTSK (Cathepsin K) ELISA Kit

大鼠组织蛋白酶L(CTSL)ELISA试剂盒 Rat CTSL (Cathepsin L) ELISA Kit

大鼠组织多肽抗原(TPA)ELISA试剂盒 Rat TPA (Tissue Polypeptide Antigen) ELISA Kit

大鼠组织纤溶酶原激活物(tPA)ELISA试剂盒 Rat tPA (Plasminogen Activator, Tissue) ELISA Kit

大鼠组织因子(TF)ELISA试剂盒 Rat TF (Tissue Factor) ELISA Kit

大鼠组织因子途径抑制物(TFPI)ELISA试剂盒 Rat TFPI (Tissue Factor Pathway Inhibitor) ELISA Kit

大鼠组织转谷氨酰胺酶(TGM2)ELISA试剂盒 Rat TGM2 (Transglutaminase 2, Tissue) ELISA Kit

大鼠胰岛素自身抗体(IAA)ELISA试剂盒 Rat IAA (Insulin Autoantibodies) ELISA Kit

大鼠利钠肽受体1(NPR1)ELISA试剂盒 Rat(NPR1)ELISA Kit

大鼠利钠肽受体1(NPR2)ELISA试剂盒 Rat(NPR2)ELISA Kit

大鼠利钠肽受体1(NPR3)ELISA试剂盒 Rat(NPR3 )ELISA Kit

大鼠细胞色素P450 3A4(CYP3A4)ELISA试剂盒 Rat(CYP3A4 )ELISA Kit

大鼠I型胶原氨基端肽 CTX-1)ELISA试剂盒 Rat(CTX-1)ELISA Kit

大鼠内源性糖皮质激素(GC)ELISA试剂盒 Rat(GC)ELISA Kit

大鼠丝氨酸棕榈酰转移酶长链碱性亚基2(SPTLC2)ELISA试剂盒 Rat(SPTLC2)ELISA Kit

大鼠丝氨酸棕榈酰转移酶长链碱性亚基1(SPTLC1)ELISA试剂盒 Rat(SPTLC1)ELISA Kit

大鼠丝氨酸棕榈酰转移酶长链碱性亚基3(SPTLC3)ELISA试剂盒 Rat(SPTLC3)ELISA Kit

大鼠三磷酸肌醇(IP3)ELISA试剂盒 Rat(IP3)ELISA Kit

大鼠雌激素(E)ELISA试剂盒 Rat(E)ELISA Kit

大鼠Ⅰ型胶原C端肽(CTX-Ⅰ)ELISA试剂盒 Rat(CTX-Ⅰ)ELISA Kit

大鼠类胰蛋白酶(TPS)ELISA试剂盒(活性)

大鼠髓过氧化物酶(MPO)ELISA试剂盒 Rat(TPS)ELISA Kit