凋亡检测试剂盒

Annexin V-FITC/PI 凋亡检测试剂盒是一种采用Annexin V-FITC 与 PI 双染法进行细胞早期凋亡分析的检测试剂盒。

细胞凋亡早期改变发生在细胞膜表面，这些细胞膜表面的改变之一是磷脂酰丝氨酸（PS）从细胞膜内转移到细胞膜外，使 PS 暴露在细胞膜外表面。PS 是一种带负电荷的磷脂，正常主要存在于细胞膜的内面，在细胞发生凋亡时细胞膜上的这种磷脂分布的不对称性被破坏而使 PS 暴露在细胞膜外。Annexin V 具有易于结合到磷脂类如PS 的特性，对 PS 有高度的亲和性。因此，该蛋白可充当一敏感的探针检测暴露在细胞膜表面的 PS。PS 转移到细胞膜外不是凋亡所独特的，也可发生在细胞坏死中。两种细胞死亡方式间的差别是在凋亡的初始阶段细胞膜是完好的，而细胞坏死在其早期阶段细胞膜的完整性就被破坏。另外一种活细胞非透过性荧光染料碘化丙啶（Propidium Iodide, PI）不能通过完整的活细胞，但能够对坏死和凋亡晚期的细胞进行染色，因此通常将Annexin V与PI配合染色，以区别凋亡早期细胞与坏死细胞和凋亡的晚期细胞。

白质的磷酸化状态。适用于Western Blot和免疫共沉淀检测磷酸化蛋白质、蛋白激酶活性测定等。

质控血清的制备：

1、收集新鲜的无溶血、无黄疸、无细菌污染的阳性血清。

2、56℃加热10小时来活。

3、离心或过滤除去沉淀。

4、用10%的小牛血清或正常人血清（PBS缓冲液）将收集的血清稀释至所需的浓度。

5、抽滤除菌，按一次使用的量分装小安瓿，封口，20℃保存备用，不可反复冻融，被检物要求检出的水平常被认为是质控血清应选择的水平。

6、标定含量，20-30次测定结果删除>±2SD数据的均值作为靶值，并与已知定值血清对比测定。

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