上海沪峥专业生产销售鸡传染性喉气管炎病毒PCR诊断试剂盒现货，我公司供应的分子生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户咨询认购。

产品详细信息

名称：鸡传染性喉气管炎病毒PCR诊断试剂盒

规格： 20T/50T

品牌：上海沪峥

【用途】 用于鸡传染性喉气管炎病毒的检测、诊断和流行病学调查。

【操作步骤】

1. 病料处理：　　

   取适量病料鼻、气管、支气管和喉部等组织，于灭菌研钵充分研磨，用PBS液按照1：5稀释成均匀乳剂，　-20℃　反复冻融3次以上。

2 . DNA的抽提　　

(1) 取已冻融好的病料，8000r/min离心5min，取上清（或T，T为质控样品）447μl，加50μl SR-I和3μl SR-II，　50℃　水浴1-2h，并不时颠倒混匀一下。

(2) 加入等量酚：氯仿（1：1），漩涡振荡20秒，　4℃　，12000r/min，离心5min。

(3) 取上清，加入等量氯仿，振荡混匀，　4℃　，12000r/min，离心5min。

(4) 取400μl上清，加入800μl无水乙醇，再加40μl SR-III，混匀。　-20℃　放置30~120min，　4℃　、12000r/min，离心10min，小心弃上清，沉淀即为DNA。用75%乙醇（灭菌双蒸水配，每次加入500μl）洗涤2次，小心吸去75%乙醇，勿使DNA丢失，室温晾干或超净工作台风干15-25min，加入15μl TU-5溶解即为模板，即用或　-20℃　保存备用。

 3 .PCR操作 

4.电泳：　　

    称量　0.25g　琼脂糖，放入锥形瓶，加入25mL 1×TAE液（可配置50×浓缩液，储存备用），于微波炉中熔解，加入1μl的TU-9混匀。封闭好电泳槽，加入梳子，倒入琼脂凝胶，待凝固后，将PCR产物6μl混合1.5μl TU-7，加样于凝胶孔中，同时在相邻孔加入3μl TU-8，在100V 电压下，1×TAE液中电泳15分钟，在紫外成像仪下观察结果

鸡传染性喉气管炎病毒PCR诊断试剂盒

【注意事项】

1. 每次使用，开盖之前请先瞬时离心，使试剂沉于管底。

2. 所有试剂在要求温度下保存，-20℃保存试剂尽量减少反复冻融，使用后的试剂立即放回，避免在室温搁置太久。

3. 尽量建立PCR试验操作区，避免交叉污染。

4. 加样和反应程序严格按照说明书进行，由于操作失误、移液器不精确、定时不准确造成无结果情况，不予负责。

5. 吸头、离心管和PCR管在使用前，要高压灭菌，操作过程尽量不要用手接触到管内壁，可用镊子夹取。

6. 注意防止试剂污染，在有效期限前用完。

1. 将qPCR试剂盒解冻，理想温度为5℃(±3℃)，置于冷冻架上。在室温21℃(±5℃)下解冻，但必须在解冻后立即使用。




2. 准备qPCR预混料(PCR管)。




3. 在qPCR预混料(PCR管)中分别加入以下物质：




①5μl阴性质控(DW)；②5μl样本提取的DNA；③5μl阳性质控DNA (PC)。




4. 轻轻混合，离心片刻。




5. 用PCR仪对样品进行PCR反应。