- 上海沪峥生物科技有限公司
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- 地址:上海市,懿行路971弄
- 品牌:上海沪峥
- 产地:国产
- 货号:HZ-75246
- 价格: ¥2600/盒
- 发布日期: 2020-06-24
- 更新日期: 2024-04-23
产地 | 国产 |
品牌 | 上海沪峥 |
货号 | HZ-75246 |
用途范围 | 科研 |
纯度 | % |
规格 | 50T |
是否进口 | 否 |
上海沪峥专业生产销售鸡减蛋综合征病毒PCR诊断试剂盒现货,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户咨询认购。
产品详细信息
名称:鸡减蛋综合征病毒PCR诊断试剂盒
规格: 20T/50T
品牌:上海沪峥
【用途】 用于鸡减蛋综合征病毒病的检测、诊断和流行病学调查。
【操作步骤】
1. 病料处理
取适量输卵管、卵巢、心、脾、肺脏等组织病料,于灭菌研钵充分研磨,用Hanks液或PBS按照1:3稀释成均匀乳剂, -20℃ 反复冻融3次以上。
2. DNA的提取
(1) 取已冻融好的病料,1000rpm离心5min,取上清200μl(或质控样品T,200μl),加25μl TU-1和3μl TU-2, 50℃ 水浴1~2h,期间轻柔振荡几次帮助裂解。
(2)加入200μl SR-I,剧烈颠倒轻摇充分混匀, 70℃ 放置10min。
(3)冷却后加入100μl异丙醇,充分混匀后,加入一个吸附柱(试剂盒内提供)中(吸附柱放入收集管中)10000rpm离心30秒,弃掉收集管中的废液。
(4)加入500μl SR-Ⅱ,10000rpm离心30秒,弃废液。
(5)加入700μl SR-Ⅲ,10000rpm离心30秒,弃废液。
(6)再加入500μl SR-Ⅲ,10000rpm离心30秒,弃废液。
(7)将吸附柱放回空收集管,13000rpm离心2min。
(8)取出吸附柱,放入一个干净的离心管中,在吸附膜的中间部位加入70μl TU-3(使用前事先预热至65 -70℃ ,有助于提高洗脱效果),室温放置3~5min,12000rpm离心1min,将得到的溶液重新加入离心吸附柱中,室温放置2min,12000rpm离心1min。
(9)洗脱液即为模板,可放在2~8℃,如果要长时间存放,可以放置在 -20℃ 。
3 .PCR操作
4.电 泳
配制1%琼脂糖凝胶,取PCR产物5uL混合1μl TU-7,加样于凝胶孔中,同时在相邻孔加3μl TU-8,在120v 电压下,1×TAE液中电泳15分钟,在紫外成像仪下观察结果。
【结果判定】
在380bp 位置出现扩增带,实验结果为阳性
【结果判定】
在380bp 位置出现扩增带,实验结果为阳性
鸡减蛋综合征病毒PCR诊断试剂盒
【注意事项】
1. 每次使用,开盖之前请先瞬时离心,使试剂沉于管底。
2. 所有试剂在要求温度下保存,-20℃保存试剂尽量减少反复冻融,使用后的试剂立即放回,避免在室温搁置太久。
3. 尽量建立PCR试验操作区,避免交叉污染。
4. 加样和反应程序严格按照说明书进行,由于操作失误、移液器不精确、定时不准确造成无结果情况,不予负责。
5. 吸头、离心管和PCR管在使用前,要高压灭菌,操作过程尽量不要用手接触到管内壁,可用镊子夹取。
6. 注意防止试剂污染,在有效期限前用完。
血清学诊断技术
血清学诊断技术是建立在抗原与相应抗体在体外发生特异性结合反应基础上的检测技术,随着科学技术的不断发展和提高,血清学抗体检测新技术层出不穷,应用面也日益扩大。如病毒中和试验、血凝和血凝抑制试验、琼脂凝胶扩散试验、血清平板和试管凝集试验、免疫胶体金层析技术、酶联免疫吸附试验等,这些试验方法已被大多数实验室熟练掌握应用。如布病采用平板或试管凝集试验,禽流感和新城疫采用血凝和血凝抑制试验,猪瘟和口蹄疫采用间接血凝试验;采用 ELISA 试验检测禽流感、猪瘟、口蹄疫等疫病,养殖场也可采用血凝试验和免疫金标技术来检测免疫抗体滴度,操作简便快速,使抗体监测技术真正得以推广 , 切实为动物疫病防控提供有力的帮助。