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I型与新型鸭病毒性肝炎一步法RT-PCR鉴别诊断试剂盒
  • 品牌:上海沪峥
  • 产地:国产
  • 货号:HZ-75242
  • 价格: ¥2600/盒
  • 发布日期: 2020-06-24
  • 更新日期: 2024-03-29
产品详请
产地 国产
品牌 上海沪峥
货号 HZ-75242
用途范围 科研
纯度 %
规格 50T
是否进口

上海沪峥专业生产销售I型与新型鸭病毒性肝炎一步法RT-PCR鉴别诊断试剂盒现货,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户咨询认购。

产品详细信息

名称:I型与新型鸭病毒性肝炎一步法RT-PCR鉴别诊断试剂盒

规格: 20T/50T

品牌:上海沪峥

【用途】 用于鸭病毒性肝炎的检测、诊断和流行病学调查【操作步骤】1.RNA提取 (1) 取疑似鸭病毒性肝炎的病料(*、*、淋巴结等)1~4g于无菌研钵,研磨并用PBS液(pH7.2~7.4)稀释成1:4乳剂,分装1.5ml灭菌EP管,反复冻融2~3次,8000r/mi离心5分钟。(病毒培养液,只需冻融1次即可8000r/min心5分钟)2)取200uL上清液(或标准品T),移入新的1.5mL灭EP管中,加入200uLSR-I,漩涡振荡混合均匀,静置5min。

(3)加75uL TU-1,漩涡振荡混合均匀,10000r/min离心5 min。

(4)将上清转移到新的2 ml离心管(试剂盒内提供)中,加入300 uL 异丙醇(1%冰乙酸),上下倒置6-8次,混合均匀。

(5)将步骤4中的混合液移入制备管中,并将制备管置于同一2 ml离心管,10000 r/min离心1min。

(6)弃滤液,将制备管置回到2 ml离心管中,加500 uL SR-II,室温静置1min,10000 r/min离心1 min。

(7)弃滤液,将制备管置回到2 ml离心管中,加700 uL SR-Ⅲ,10000 r/min离心1 min。

(8)将制备管置回到2 ml离心管中,10000 r/min离心1 min。

(9) 将制备管置于洁净的1.5 ml离心管中(试剂盒内提供),在制备管膜中央加40 uL TU-2, 室温静置1 min。10000 r/min离心1 min洗脱。洗脱液即为模板,即用或-70℃冻存备用。

3 .PCR操作 

4.电泳

配制1%琼脂糖凝胶,取PCR产物5uL混合1uL TU-8,加样于凝胶孔中,同时在相邻孔加3uLTU-7,在120v 电压下,1×TAE液中电泳15分钟,在紫外成像仪下观察结果。

【结果判定】

在约230bp位置出现扩增带,实验结果为I型鸭肝炎病毒检测为阳性;在约705bp位置出现扩增带,实验结果为新型型鸭肝炎病毒检测阳性

 

I型与新型鸭病毒性肝炎一步法RT-PCR鉴别诊断试剂盒

【注意事项】

1. 每次使用,开盖之前请先瞬时离心,使试剂沉于管底。

2. 所有试剂在要求温度下保存,-20℃保存试剂尽量减少反复冻融,使用后的试剂立即放回,避免在室温搁置太久。

3. 尽量建立PCR试验操作区,避免交叉污染。

4. 加样和反应程序严格按照说明书进行,由于操作失误、移液器不精确、定时不准确造成无结果情况,不予负责。

5. 吸头、离心管和PCR管在使用前,要高压灭菌,操作过程尽量不要用手接触到管内壁,可用镊子夹取。

6. 注意防止试剂污染,在有效期限前用完。

血清学诊断技术


 血清学诊断技术是建立在抗原与相应抗体在体外发生特异性结合反应基础上的检测技术,随着科学技术的不断发展和提高,血清学抗体检测新技术层出不穷,应用面也日益扩大。如病毒中和试验、血凝和血凝抑制试验、琼脂凝胶扩散试验、血清平板和试管凝集试验、免疫胶体金层析技术、酶联免疫吸附试验等,这些试验方法已被大多数实验室熟练掌握应用。如布病采用平板或试管凝集试验,禽流感和新城疫采用血凝和血凝抑制试验,猪瘟和口蹄疫采用间接血凝试验;采用 ELISA 试验检测禽流感、猪瘟、口蹄疫等疫病,养殖场也可采用血凝试验和免疫金标技术来检测免疫抗体滴度,操作简便快速,使抗体监测技术真正得以推广 切实为动物疫病防控提供有力的帮助。