细胞的复苏方法

发布时间： 2016-12-12   

1．复温从液氮中取出冻存管，立即放入37～40℃水浴中，快速摇晃直至完全融化，应在1分钟内完成复温过程。

2．去除冻存液无菌打开冻存管，将细胞冻存液移入无菌的离心管内，加入约5 ml生长液，轻轻摇匀，将细胞悬液经1000r/min离心5分钟，弃上清液。

3．复苏培养离心后细胞沉淀用少量生长液悬浮，转入培养瓶中补齐培养液，即配成所需要的细胞浓度，置37℃,5% CO₂孵箱培养。或无菌操作打开冻存管，将细胞悬液吸到培养瓶中补足生长液后，置37℃ 5% C0₂孵箱中培养，4～6小时后，待细胞贴壁后轻轻倒掉含冻存液的生长液，换生长液后继续培养。